友康病毒采樣管技術優(yōu)勢大比拼——第六彈……

自從10月額濟納旗疫情爆發(fā)之后，中國北方的疫情此起彼伏，相關疫情多點暴發(fā)，且大多規(guī)模浩大，狡猾的疫情你方唱罷我登場，防不勝防。

突變數(shù)量是德爾塔病毒的兩倍之多、具有更高的傳播性和一定程度的免疫逃逸的“奧密克戎”更是來勢洶洶，使得人心惶惶，天災不可免，我們所能做的便是盡最大可能避免采樣操作及核酸提取中的“人禍”，一款滅活性能足夠可靠的滅活型病毒采樣管成了很多工作人員“避免”人禍的最大寄托。

為此我們針對友康滅活型采樣管的滅活性能做了以下實驗驗證——

一：實驗依據(jù)

新冠病毒具有極強的傳染性和致病性，進行檢測時，醫(yī)護人員面臨著較大的感染風險。選用了滅活型病毒采樣管產(chǎn)品的客戶在操作過程中會一定程度的降低戒備心，一般會去除56℃滅活的處理過程，如果采樣液本身不能對病毒進行及時的殺滅，其存在的安全風險會比非滅活型更高。

友康滅活型病毒采樣管產(chǎn)品以多項滅活試劑聯(lián)用的策略，采用胍鹽為主，多組分配合的方案，不僅在5分鐘內(nèi)即可對病毒樣本實現(xiàn)完全滅活，同時又不影響下游的核酸檢測結(jié)果。

已有大量新冠病毒研究的數(shù)據(jù)表明在病毒濃度最高的階段，新冠患者的口咽采樣和鼻炎采樣得到的病毒載量都低于10¹⁰ copies/mL的濃度范圍內(nèi)。所以我們采用滅活型的病毒采樣管產(chǎn)品處理10¹⁰ copies的病毒，以評價滅活液的滅活效果。

參考文獻：

Nature . 2020 May;581(7809):465-469. 

J Clin Microbiol . 2020 Jul 23;58(8):e01068-20.

https://doi.org/10.1101/2020.04.16.20067835

二：實驗材料

1）實驗用冠狀病毒：采用豬傳染性腸胃炎、豬流行性腹瀉這兩種冠狀病毒二聯(lián)活疫苗（HB08株+ZJ08株）經(jīng)感染細胞后擴增得到的病毒液作為病毒原液。這兩種冠狀病毒與新型冠狀病毒相似，且可以實現(xiàn)病毒在細胞中的擴增，適合用作實驗的材料。

2）感染用細胞：VERO細胞。

3）滅活采樣液：友康生物MT-0501產(chǎn)品滅活采樣液。

4）主要試劑耗材：DMEM培養(yǎng)基，胎牛血清，病毒分離無血清培養(yǎng)基，PBS，TPCK-胰酶。

三：實驗方案

模擬采樣過程，將病毒液加入到滅活采樣液中，進行充分混合，分別在不同的時間點終止滅活。并用終止滅活后的混合液去感染細胞，觀察是否發(fā)生病變。

1）病毒液加入滅活采樣液。室溫下，將濃度為10¹⁰ copies/mL的冠狀病毒以1：1體積比例加入至滅活采樣液中，渦旋15s充分混合，相當于每毫升滅活液中加入10¹⁰ copies的病毒顆粒。

2）1min之后從混合液中取出100μL，采用友康病毒分離無血清培養(yǎng)基進行1000倍稀釋以中和滅活液，終止滅活。

3）5min、10min和20min之后分別從混合液中取出100μL，與上步相同的方式，采用病毒分離無血清培養(yǎng)基進行1000倍稀釋以中和滅活液，終止滅活。

4）陰性對照組為采用病毒分離無血清培養(yǎng)基對滅活采樣液稀釋2000倍的混合液。

5）陽性對照組為采用病毒分離無血清培養(yǎng)基對病毒液稀釋2000倍的混合液。

6）采用各處理組感染細胞，連續(xù)觀察并記錄細胞病變情況。

4、實驗結(jié)果

接毒后3天各組細胞的病變情況：

陰性對照組細胞生長正常：

病毒經(jīng)滅活5分鐘處理，細胞生長正常，無感染：

病毒經(jīng)滅活10分鐘處理，細胞生長正常，無感染：

病毒經(jīng)滅活20分鐘處理，細胞生長正常，無感染：

陽性對照組未經(jīng)滅活液處理組，細胞發(fā)生顯著病變：

5、實驗結(jié)論

友康的滅活采樣管產(chǎn)品對采集到的病毒樣本在采樣混合后5分鐘即可實現(xiàn)滅活冠狀病毒，使其失去感染能力。